Analiza Proteinelor

Analiza Proteinelor prin spectrometria FT-IR

Vibratiile moleculare in spectrometria FT-IR sunt masurate prin absorbtia specifica a radiatiei infrarosu de catre legaturile chimice. Intrucat tehnica IR se supune legii Lambert-Beer, spectrul proteinei poate fi utilizat pentru determinarea concentratiei acesteia. In cateva secunde si fara nici o tehnica de colorare imuno- sau biochimica, se pot determina concentratii ale proteinei in domeniul 0,1 mg/ml - >100mg/ml direct din solutia nediluata.

Cu toate acestea, continutul informatiilor spectrului IR al proteinei nu se limiteaza la banda I a gruparii amidice. Lanturile diversilor aminoacizi pot fi de asemenea monitorizati direct si comparati in diferite conditii de mediu (pH, saruri, liganzi) sau in proteine mutante cu secventa primara modificata.

Avantajele analizei infrarosu a proteinelor sunt usurinta de utilizare si capacitatea relativ ieftina de a studia proteinele in medii apoase indiferent de conditiile de tamponare.

In cercetare, se urmareste observarea efectelor structurale asupra unei proteine, in timp ce aceasta se leaga de medicamente sau interactioneaza cu diferite substraturi si/sau inhibitori. Mai mult decat atat, cu ajutorul spectrometriei IR se poate monitoriza in timp real formarea structurilor multimerice, cum ar fi agregatele sau fibrilele. Ar trebui subliniat faptul ca aceste investigatii nu se limiteaza la studiul proteinelor solubile in apa, putand fi de asemenea efectuate pe proteine de membrana.

CONFOCHECK este spectrometrul FT-IR conceput special pentru a satisface cerintele exigente cerute in analiza proteinelor in solutiile apoase. Conceptul sa specific faciliteaza achizitia rapida a datelor pe un numar mare de probe controlat de o interfata software usor de utilizat.

Aplicatii pentru CONFOCHECK:

Ø Dinamica proteinelor (influenta temperaturii asupra modificarilor conformationale);

Ø Cuantificarea proteinelor (de la 0,03mg/ml pana la >100mg/ml in solutii apoase);

Ø Determinarea structurii secundare a proteinelor;

Ø Monitorizarea modificarilor conformationale in timpul procesului de agregare, precipitare si cristalizare a proteinelor.

AquaSpecCell BioATRII